OPTIMIZACIÓN DE UN PROTOCOLO PARA LA EVALUACIÓN DE LA DL50 ENTenebrio molitor LARVARS UTILIZANDO ANTIHONGOS COMERCIALES COMO REFERENCIA PARA EL ENSAYO DE NUEVOS COMPUESTOS

Resumen

La creciente demanda de metodologías éticas, económicas y sostenibles ha impulsado el desarrollo y la validación de modelos alternativos al uso de animales en la experimentación científica. En este contexto, el principio de las 3R (reducción, sustitución y refinamiento) se ha convertido en una directriz fundamental y ha sido adoptado por las principales legislaciones reguladoras, como la Ley Arouca en Brasil y las directrices de la OCDE (Organización para la Cooperación y el Desarrollo Económico). Se discutieron los hitos históricos y la evolución normativa de los métodos alternativos, así como los modelos in vitro, in silico e in vivo disponibles. El objetivo de este estudio era optimizar un protocolo para determinar la dosis letal media (DL50) utilizando larvas de Tenebrio molitor expuestas a antifúngicos comerciales, utilizados en este trabajo como sustancia modelo. Destacamos el uso de T. molitor como modelo experimental prometedor debido a su practicidad de manejo, bajo coste, robustez inmunológica y similitudes fisiológicas con los vertebrados. También se analizó la toxicidad de los fármacos anfotericina B, caspofungina e itraconazol, teniendo en cuenta sus mecanismos de acción, espectro terapéutico y efectos adversos. La adaptación del protocolo experimental basado en Brai et al. (2023) pretende establecer una herramienta eficaz y reproducible para el cribado toxicológico preliminar, permitiendo su futura aplicación en la evaluación de la toxicidad de nuevos compuestos con potencial terapéutico. Los resultados indicaron una DL50 de 750 mg/kg para los tres antifúngicos ensayados, sin diferencias estadísticamente significativas entre ellos (p > 0,05). Este enfoque contribuye al avance de estrategias preclínicas más éticas, fiables y accesibles, reforzando el uso de modelos alternativos en la investigación científica.